外泌體的研究離不開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)。以腫瘤相關(guān)外泌體研究為例，目前，收集腫瘤細(xì)胞外泌體主要有兩種方法：

方法一

使用正常培液養(yǎng)細(xì)胞再換無(wú)血清培液收外泌體。

方法二

直接使用exosome-free FBS配制培養(yǎng)基用于培養(yǎng)細(xì)胞收外泌體。

首先，就是基本的離心條件了，目前超離比較好的就是貝克曼或者日立的了，這兩家超離在行業(yè)內(nèi)算是翹楚了。其次就是離心參數(shù)了：120000 g，4℃，離心14h，離心結(jié)果如圖：

1：離心后，血清外泌體會(huì)富集在管底和管壁；

2：吸取血清時(shí)，只吸取澄清部分的血清，并且遠(yuǎn)離上圖中標(biāo)記的區(qū)域；

3：吸取70-80%的澄清的血清；（注意：動(dòng)作慢，動(dòng)作輕）

4：其余的渾濁血清留作正常細(xì)胞的的營(yíng)養(yǎng)物添加使用，避免浪費(fèi)。

5：如果覺(jué)得純度不夠，再把離心后收集的血清做二次超速離心。

6：針對(duì)超速離心后的血清，必須進(jìn)行粒徑檢測(cè)（離心前樣品和離心后樣品），該數(shù)據(jù)可以放到文章補(bǔ)充材料中，用來(lái)證明無(wú)血清外泌體制備成功。