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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章無外泌體血清Exo-FBS說明書

無外泌體血清Exo-FBS說明書

更新時間:2020-04-27點擊次數(shù):2315

無外泌體血清Exo-FBS說明書

產(chǎn)品名稱:無外泌體血清|去除外泌體胎牛血清

貨號:Exo-FBS

規(guī)格:50ml

備注:少量現(xiàn)貨,干冰運輸......

一、外泌體的基本信息

⊙外泌體的大?。和饷隗w的直徑約40-150nm

⊙從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體(exosomes)或微泡(microvesicles)

⊙外泌體屬于胞外囊泡類,除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡

⊙外泌體的直接比微泡的要小,后者直徑為100nm-1μm

⊙外泌體的數(shù)量:人體中大約有1014個,近乎于平均每個細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個

⊙外泌體的細(xì)胞源:人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體

⊙外泌體具有異質(zhì)性,即使是同一種細(xì)胞分泌的外泌體都有可能具有很大功能區(qū)別

⊙外泌體的存在:外泌體幾乎存在于所有的組織、細(xì)胞間隙、體液中

什么是外泌體?

答:Exosome,中文名外泌體,是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),直徑大約40-100 nm。細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,它的主要來源是細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到細(xì)胞外基質(zhì)中。外泌體天然存在于體液中,包括血液、尿液、唾液、腦脊液及乳汁中,參與細(xì)胞間通訊。

外泌體研究,應(yīng)選用血漿還是血清?

答:血清是血液凝固之后收集的液體,所以其中少了纖維蛋白原,凝血因子,以及多了很多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。

血漿=血液-血細(xì)胞  

血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子

所以一般實驗選擇血漿,在特殊情況下,如研究與血小板相關(guān)的疾病的時候,當(dāng)然是血清更適合。

、外泌體研究的主要應(yīng)用
外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。有研究表明腫瘤來源的外泌體參與到腫瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了腫瘤的生長與侵襲。
腫瘤

  • 腫瘤轉(zhuǎn)移。來自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血?。ˋML)細(xì)胞的增殖、遷移和抑制細(xì)胞凋亡。
  • 治療靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRAS G12D,從而特異性高效靶向至胰腺癌細(xì)胞,以顯著降低RAS活化、癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。

免疫

  • β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝器官或免疫內(nèi)皮細(xì)胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。

心血管

  • 外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動脈粥樣硬化

分子標(biāo)記

  • 疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、病毒性肝炎、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞癌中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。
  • 預(yù)后標(biāo)志。

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蘇州千舍帶你了解下外泌體! 外泌體到底是個啥?莫愁:外泌體么,簡單點講就是:“老司機(jī),帶帶我……”。大概就是在細(xì)胞內(nèi)部由細(xì)胞內(nèi)多泡體形成的一個囊泡,裝載了一堆亂七八糟的東西,然后分泌出體外,然后進(jìn)入另一個細(xì)胞,把這堆亂七八糟的東西卸車的一個過程。

外泌體大小跟病毒差不多大,反正是蠻小的了。

所以外泌體的研究方法基本是這樣的:

首先,用無外泌體的血清培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),否則就干擾了。

接著,就是低速離心去除細(xì)胞。

然后通過過濾,剛剛也說過大小了哈,過濾后,把細(xì)胞微泡去除掉,剩下的就是外泌體了。

接著高速離心,富集外泌體:

然后,研究的套路一般都是進(jìn)行外泌體的鑒定,可以通過電鏡,或者WB來鑒定,因為外泌體是有標(biāo)志物的,像下面這樣:

這時候可以選擇細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的特異性分子Calnexin來作為陰性對照。

用外泌體也可以做流式分析,但是,外泌體做流式分析,但是,你要記住外泌體很小,跟病毒差不多大。所以做流式前要用包被了抗體的珠子(beads)先結(jié)合上外泌體,然后進(jìn)行流式的分析,就像這樣:

實關(guān)鍵還是在外泌體內(nèi)部的那些miRNA和mRNA的抽提和鑒定,研究外泌體的具體機(jī)制,還是靠上車的這堆貨。

現(xiàn)在大概了解外泌體研究要做些什么了吧?

一般來說,這個老司機(jī)帶上車的都是些miRNA和mRNA,不過大概也有l(wèi)ncRNA,有的時候不巧也會有點DNA。下面就是外泌體里一般的RNA分布,有蠻多miRNA,所以老司機(jī)外泌體有可能會參與某些調(diào)控機(jī)制。

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