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當前位置:首頁技術(shù)文章SGC7901/FU 人胃癌氟尿嘧啶耐藥株

SGC7901/FU 人胃癌氟尿嘧啶耐藥株

更新時間:2024-07-08點擊次數(shù):1365

名稱:SGC7901/FU 人胃癌氟尿嘧啶耐藥株

種屬:人;女性

組織來源:胃癌

生長特性:貼壁生長

形態(tài)特征:上皮細胞

微生物及支原體檢測:陰性

安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+1ug/ml FU

血清我們推薦用:

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法:

收到細胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細胞脫落后,加入2ml 以上WAN培養(yǎng)基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加WAN培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注:1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯(lián)系。

凍存方法: 凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO

儲存:液氮儲存

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BIU-87/DDP

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